Induced pluripotent stem cells from adult human adipose stem cells free of vector and transgene sequences

Abstract

We show here a novel strategy to transfect human MMSC cells by using of the new type of episomal self-destructing vector system to produce induced pluripotent stem cells. The number iPS colonies and hence the number of reprogramming events was significantly higher for our new method (221.88+/-38.28 colonies, 2.24+/-0.77%.) when compared with the standard protocol (118.20 +/- 38.28 colonies, 1.14 +/- 0.77% p=0.97). MMSC iPS cells were demonstrated to express markers of pluripotency and could differentiate to the three germ layers, both in vitro and in vivo, to cells representative of the three germ lineages. Our findings confirm that MMSC are an ideal candidate as a readily accessible somatic cell type for high efficiency establishmept of iPS cell lines, especially when using new "push pull" protocol.

Представлена новая стратегия получения индуцированных плюрнпотентных стволовых клеток (иПК) путем трансфекции мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток человека (ММСК) с использованием эписомного саморазрушающегося вектора. Число колоний иПК и, следовательно, число событий перепрограммирования была значительно выше для нового метода (221,88+/-38,28 колоний, 2,24+/-0,77%.) по сравнению со стандартным протоколом (118,20+/-38,28 колоний, 1,14+/-0,77% р=0,97). Было продемонстрировано что полученные иПК репрезентируют маркеры плюрипотентности и могут дифференцироваться в три зародышевых листка как in vitro так и in vivo и свободны от вектора или трансгенных последовательностей. Полученные данные подтверждают, что ММСК являются идеальным кандидатом для создания иКП с высокой степенью эффективности.