Разработка методов оценки мутационного статуса гена №3 и уровня экспрессии генов севра и baalc, включенных в патогенез острого миелобластного Лейкоза

Abstract

Background. According to the WHO classification 2008 there are some genetic abnormalities - 1(8;21), inv(16), t(15;17), etc, typical for AML. Mutations in the NPM1, CEBPA and FLT3 genes, named as «provisional entity», were proposed for the diagnostics of cytogenetically negative AML. Aim: investigation of FLT3 mutation status and CEBPA and BAALC genes expression status as additional prognostic factors in AML. Methods. In the study was analyzed 92 AML, 30 acute lymphoblastic leukemia (ALL) primary patients and 32 healthy donors. A diagnosis of AML was verified by using the method of multicolor flow cytometry, morphology, cytochemistry. Genetic studies included: mutation of FLT3-ITD, FLT3-D835Y and CEBPA and BAALC expression analysis. Results. Mutations of FLT3-ITD and FLT3-D835Y were detected in 16% and 7% of AML cases, respectively. The BAALC mRNA level in AML patients was at 2 logs higher than in the control group, however, the mRNA level of CEBPA gene in AML patients was at 2 logs lower than the control group. Expression status of these genes in ALL patients was not significance. Conclusions. Assessment of CEBPA and BAALC expression profile seems to provide an additional diagnostics marker in cases of cytogenetically normal AML patients. Prognostic significance of these markers should be confirmed in further studies.

Введение: Согласно классификации ВОЗ 2008 года некоторые генетические поломки являются специфичными для ОМЛ. Однако, диагностика ОМЛ без выявленных цитогенетических нарушений представляет достаточно серьезную проблему и требует разработки дополнительных верификационных технологий. Цель: исследование мутационного статуса гена FLT3 и оценка экспрессии генов BAALC и СЕВРА, как дополнительных прогностических факторов при ОМЛ. Методы: В данной работе было обследовано 92 пациента с ОМЛ, 30 пациентов с ОЛЛ и 32 донора. Диагноз ОМЛ был верифицирован с помощью методов многоцветной проточной цитометрии, морфологии, цитохимии. Было проведено определение мутаций FLT3-ITD и FLT3-D835Y и оценка зкспрессионного статуса генов СЕВРА и BAALC. Результаты: Мутации FLT3-ITD и FLT3-D835Y выявлены в 16% и 7% случаев ОМЛ соответственно. Уровень мРНК гена BAALC у пациентов с ОМЛ был повышен в два раза по сравнению с уровнем в контрольной группе; тогда как уровень мРНК гена СЕВРА был снижен в два раза по отношению к группе сравнения. Изменения экспрессии данных генов у пациентов с ОЛЛ отклонялся от группы сравнения в незначительной степени. Заключение: Выявление уровня экспрессии генов СЕВРА и BAALC может служить дополнительными диагностическим маркером при оценке случаев цитогенетически нормального ОМЛ. Прогностическое значение зкспрессионного статуса этих генов будет изучено в дальнейших исследованиях.