Экспериментальное обоснование нового метода иммунодиагностики туберкулезных плевритов

Abstract

The current study was perfomed to investigate the representativeness of the basic and antigen induced levels of specific (IFN-γ) and non-specific (IL-6) biomarkers for the diagnosis of tuberculous pleural effusion. Ninety-three samples of pleural fluid from patient with tuberculosis (TP) and non-tuberculosis (Non-TP) pleurisy were examined. Induction of the synthesis IFN-gamma by immunocompetent cells in pleural exudate was carried out by the recombinant protein CFP10-ESAT6 contained in the diagnosticum «DIASKINTEST» by our method (Patent RF, № 2664427; 2017). Serum and pleural fluid IFN-γ and IL-6 levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay technique (enzyme-amplified sensitivity immunoassay kits, Vector-Best reagent kit (Russia). Our results suggested that introduction of M. tuberculosis antigens into the pleural fluids samples of TP group caused a significant increase of the IFN-γ levels compared to basic level, which were not observed in the Non-TP group. Detection of IFN-gamma antigen-induced level in pleural fluid is a promising method for the diagnosis of tuberculous pleurisy. We found no significant differences in the basic and antigen-induced levels of IL-6 in patients with TP and Non-TP pleurisy.

На основании исследования 93 образцов плевральной жидкости больных туберкулезным и нетуберкулезным плевритом оценена репрезентативность базового и стимулированного уровней специфических (ИФН-γ) и неспецифических (ИЛ-6) биомаркеров в подтверждении туберкулезной этиологии воспаления. Синтез ИФН-γ в образцах плеврального выпота и периферической крови индуцировали рекомбинантным белком CFP10-ESAT6 в составе отечественного диагностикума «ДИАСКИНТЕСТ» по разработанной нами методике (патент РФ № 2664427). концентрации ИФН-γ и ИЛ-6 определяли методом иммуноферментного анализа с использованием набора реагентов компании «Вектор-Бест» (Россия). Показано, что специфическая антигенная стимуляция клеток плеврального экссудата у больных туберкулезным плевритом, в отличие от выпота другой этиологии, сопровождается значительным и статистически высокозначимым ростом уровня ИФН-γ, что определяет перспективы ее применения в диагностике туберкулезной этиологии плевральных выпотов. Значимых различий базового и стимулированного уровней ИЛ-6 у пациентов с плевритом туберкулезной и нетуберкулезной этиологии не выявлено.